英雄联盟劲夫是什么梗与劲哥

相信喜欢英雄联盟的玩家都知道，游戏中很多英雄其实都会拥有外号，而且一般来说都比较形象，所以在玩家们的口中流传也是比较广泛。但令人没想到的是，最近却因为腕豪这个英雄的外号，在网上引发了不小的阵容，并且让选手都集体出面道歉。

腕豪这个英雄推出之后，其实就拥有比较高的人气，虽然说技能简单，但强度却非常高，除了AD位置以外其它都能打。而由于腕豪的战斗方式是使用拳头，而且因为其他种种原因，所以也被玩家们起了“劲夫”这个称号。

在现在的游戏中，很多人都会将腕豪称呼为“劲夫”，而且由于他确实比较克制青钢影、刀妹、锐雯、剑姬这些女性英雄，所以也诞生了很多“梗”，平时玩家们在网上开玩笑的时候都会说到，估计很多人都有听过。

但就是这个很多玩家都非常熟悉的称号，最近却被人故意带节奏，认为是不尊重女性的说法， 娱乐圈的明星王俊凯甚至因此登上了热搜，并且很多选手都受到了影响，在之后不得不直播进行道歉，可以说是非常离谱了。

其实这件事的来龙去脉也很简单，在差不多半年之前，王俊凯就找了RNG战队的退役选手MLXG一起打游戏，并且在游戏过程中提到了“劲夫”这个称号。可能也是担心引起节奏，所以MLXG并没有接话，但也引起了很多人的讨论。

本来这件事已经过去很久了，不少玩家都彻底忘记。但最近却有某些人特地翻了出来，并且以此对王俊凯进行攻击，表示他在玩游戏的时候说这些“梗”，存在不尊重女性的意思。

现在王俊凯的热度相信大家都知道，所以这件事发生之后就引起了很多人的关注，甚至真的有不少人因此对王俊凯进行攻击。而一些曾经在直播中说过这些“梗”的选手，也因此受到了影响。

可能是因为这件事闹得比较大，所以官方应该也和选手进行了沟通。随后IG战队的宁王、EDG战队的Meiko、FPX战队的刘青松，都进行直播并且对此进行了道歉，表示以后会注意自己的言行，不会说这些“梗”。

要知道这三位选手，在LPL赛区中已经是有不少人气了，但没想到现在还是被带节奏。比如说EDG战队的Meiko，平时因为性格比较好，所以在粉丝中的口碑也相当不错，但这次依然是因为被带节奏，所以出面进行道歉。表示会注意言行。

至于宁王和刘青松就更不用说了，宁王以前都是非常“嘴硬”的，而刘青松的性格也不会在乎这些事情，但他们依然是进行了道歉，可见肯定是官方给了压力，否则的话不可能集体因为这件事道歉。

不得不说，现在LPL赛区的发展确实越来越好，但因此经常会被带节奏，一个不消息的话可能就影响到外界都游戏、电子竞技的评价。就算是都知道这个“梗”其实是没有不好的意思，但选手迫于压力依然是要进行道歉。

其实这件事总体来说也并没有什么，选手道歉也只是小事而已。但长远来看的话，还是让人非常担心的。现在职业选手因为喊了英雄外号就要被迫道歉，谁知道以后还会不会发生类似的事情，难道说之后都只能叫英雄的全名了？

而且腕豪的这个称号，本身就没有任何不好的意思，反而是在嘲讽那些暴力行为，现在却被曲解了。也不知道现在游戏圈的一些“梗”得到关注，到底是好事还是坏事。

编辑：劲哥
文字：劲哥

基因编码的荧光生物传感器是追踪化学过程的有力工具，可应用于完整的生物系统。但生物传感器的开发和优化仍然面临挑战和繁重的工作量，主要因为目前筛选候选生物传感器的方法存在技术限制。

本研究介绍了一种结合液滴微流体和自动荧光成像的筛选方法，极大提高了筛选的吞吐量。与目前只能一次筛选单个生物传感器特征，如亮度的技术不同，我们的方法能够同时评估多个特征，如对比度、亲和力和特异性。

这种能力对于快速优化至关重要，因为生物传感器的特征可能存在共变关系。利用该筛选系统，我们成功开发了一种高性能的乳酸生物传感器，可用于定量测量细胞内乳酸浓度。该名为LiLac的生物传感器在代谢物传感方面取得了重要进展，展示了我们筛选方法的强大能力。

基因编码的荧光生物传感器能够在活细胞中直接表达并针对特定细胞类型和细胞器提供高时间分辨率的荧光信号，覆盖了快速时间尺度和长时间成像期间的测量需求。由于单个细胞的代谢可能存在差异且代谢产物周转速度较快，这些生物传感器能够准确测量单个细胞的基线代谢状态和代谢变化。

为了量化代谢物浓度，荧光生物传感器的读数必须具备适应目标配体的生理浓度、高度特异性以及对细胞环境和表达水平的变化具有鲁棒性的特点。然而，筛选这些高性能生物传感器面临挑战，因为现有的筛选方法在可测试条件的数量上仍有限制。

通过结合液滴微流体和自动双光子荧光寿命成像技术，克服这些限制可以显著提高了筛选的内容和吞吐量。基于荧光寿命的传感器已成为量化细胞内小分子水平的高性能工具。

我们利用微流体制备的半透明凝胶壳珠作为微型透析室，在多种条件下评估数千个独立分离的寿命传感器变体，以评估其亲和力、特异性和响应特性。

我们还成功开发和优化了名为LiLac的高性能乳酸寿命传感器。乳酸是在跨细胞和组织间传递氧化还原状态以及某些癌症类型中起到关键作用。LiLac表现出较大的响应幅度、对生理乳酸浓度的特异性以及对钙和pH变化的抵抗力。

它的寿命响应非常精确，无需标准化，有助于定量活细胞中的乳酸浓度。

基因编码能够在活细胞中直接表达，并通过提供高时间分辨率的荧光信号，在快速和慢性成像期间提供准确的代谢状态测量。这些生物传感器具有针对特定细胞类型和细胞器的靶向能力，能够精确测量单个细胞的基线代谢状态和代谢扰动。考虑到单个细胞的代谢差异以及代谢物的快速周转，荧光生物传感器能够提供高度精确的测量结果。

为了量化代谢物浓度，荧光生物传感器的读数需要满足以下要求：它们需要适应目标配体的生理浓度；具有高度特异性，能够与目标配体高度选择性地结合；对细胞环境的变化和传感器自身的表达水平变化具有鲁棒性。筛选具备这些高性能特征的生物传感器是具有挑战性

荧光寿命是光子吸收和发射之间的平均时间，寿命传感器已成为量化细胞内小分子水平的高性能工具。我们利用微流体制备的半透明凝胶壳珠作为微型透析室，评估了数千种独立分离的寿命传感器变体，并在多种不同条件下对它们的亲和力、特异性和响应特性进行了分析。

我们还以LiLac为例，展示了这种筛选方法的优势，并成功开发和优化了一种高性能乳酸寿命传感器。乳酸作为糖酵解的关键产物，在血液循环中被认为是主要的细胞燃料，并在跨细胞和组织之间传递氧化还原状态。

LiLac具有较大的响应幅度，能够特异性地识别生理乳酸浓度，并对钙和pH的变化具有较强的抵抗力。它的寿命响应非常精确，无需标准化，有助于定量活细胞中的乳酸浓度。LiLac成为研究单个细胞水平新陈代谢的强大工具，同时也展示了我们筛选方法的效果和优势。

玻璃壳珠是理想的微型容器，可用于在各种条件下检测生物传感器，如剂量反应曲线或特异性检测。GSB具有半透性的外壳，可以交换小分子，同时保留DNA和生物传感器蛋白。

我们发现GSB能够自然地附着在干净的玻璃盖片上，这可能是由于壳中暴露的正电荷与玻璃表面上的负电荷之间的吸附作用。

通过对含有预先纯化的生物传感器蛋白的GSB进行成像，可以通过交换周围溶液中附着的GSB来测量生物传感器的荧光信号。这种测量形式比多孔板或微毛细管更适合测试各种条件。

我们可以利用这种方法来测量生物传感器对ATP或NADH等分析物的反应，这表明GSB的聚电解质壳甚至允许具有多个电荷的中等大小的生物分子通过。

下图为GSB 作为筛选基因编码荧光生物传感器的平台，包含质粒 DNA 和荧光生物传感器蛋白的 GSB 的卡通描述。

琼脂糖凝胶核心包裹在聚电解质壳中，报告的分子量截止值为 ~2 kDa 17。b单个 20 μm GSB 掺杂绿色荧光生物传感器，明场（左）和落射荧光（右），5 μm 比例尺。c Peredox 的剂量响应曲线，一种对 NAD + /NADH 1 , 47有响应的荧光寿命传感器，在 pH 7.3 和 34 °C 下在封装在 GSB 中的纯化生物传感器蛋白上获得（平均值 ± SD）。纯化的乳酸脱氢酶 (LDH) 加上乳酸和丙酮酸用于设置 NAD +/NADH 比率在 GSB 之外，遵循先前为 Peredox 47建立的方法。LDH 不进入 GSB。

d用于生成 ( c ) 中数据的荧光寿命图像的胶片，根据右侧的寿命热图进行伪彩色处理，并按乳酸/丙酮酸盐 (L/P) 的顺序排列。30 微米比例尺。电子BeadScan 概览示意图。来自生物传感器库的单个质粒被分离在微流体液滴中，这些液滴用作皮升大小的反应室，用于基于 PCR 的扩增。

克隆扩增子固定在引入每个液滴的亲和珠上，最终产生克隆 DNA 珠库。然后将单个珠子重新封装在含有用于生物传感器表达的体外转录/翻译 (IVTT) 试剂的新液滴中。然后将含有成熟生物传感器的 IVTT 液滴转化为半透性凝胶壳珠 (GSB)。多达 10,000 个 GSB 排列在玻璃盖玻片上，用于自动荧光成像和分析。通过微量移液器收集显示有利生物传感器特性.

为了展示我们系统的能力，我们着手为乳酸生成一个从头基因编码的生物传感器。现有的用于乳酸的 FRET 生物传感器 Laconic 已用于研究神经元代谢，但它对乳酸和因使用两种荧光团而引起的光学并发症的浅层反应使定量使用具有挑战性。

较新的单荧光团生物传感器、 GEM-IL、Green Lindoblum、CanlonicSF 和 eLACCO1.1 GEM-IL 对生理 pH 变化有反应，使准确的乳酸测量变得复杂；Green Lindoblum 对生理范围之外的乳酸具有非常高的亲和力；CanlonicSF 和 eLACCO1.1 对乳酸和钙都有反应，限制了它们对钙饱和水平的隔室的效用。

CanlonicSF 和 eLACCO1.1 基于来自嗜热嗜热杆菌的 TTHA0766 周质乳酸和钙结合蛋白，而所有其他现有的乳酸生物传感器使用来自大肠杆菌和谷氨酸棒杆菌的 LldR 转录因子。

本论文介绍了一种利用液滴微流体和自动双光子荧光寿命成像技术的高通量多参数筛选方法，用于快速开发和优化可溶性基因编码荧光生物传感器。通过采用半透性凝胶壳珠（GSB）作为微型透析室，我们能够在各种条件下评估大量独立的传感器变体，分析其亲和力、特异性和响应特性。

同时，我们还成功开发和优化了一种名为LiLac的高性能乳酸寿命传感器，该传感器对生理乳酸浓度具有特异性，且具备较大的响应幅度，对钙和pH变化表现出抵抗力。

通过该筛选方法，我们为研究细胞新陈代谢提供了强大的工具，能够准确测量单个细胞的代谢状态和扰动，同时克服了传统筛选方法的限制。

这种方法的应用不仅有助于开发更高性能的荧光生物传感器，还为探究细胞内小分子水平的代谢过程提供了新的可能性。因此，本研究在加速生物传感器领域的发展和应用方面具有重要的价值。

olina，R.S.。在双光子激发下筛选荧光蛋白的高通量仪器。《快报》117192–7203（2020）。

Dana用于神经元群体和微室成像活动的高性能钙传感器。国法16，649–657（2019）。

Manna，P.使用微流体分类器对FusionRed中激发态寿命和亮度的定向进化。生物学报10116-526（2018）。